魏文斌
首都医科大学附属北京同仁医院同仁眼科中心 100730
目的:应用比较蛋白质组学技术,比较葡萄膜黑色素瘤患者与正常人以及葡萄膜黑色素瘤患者肿瘤切除前后3个时间点的血清多肽谱,分析鉴定差异表达多肽。
方法:收集葡萄膜黑色素瘤患者术前、术后1月和术后6月的血清43份和正常人血清25份。血清蛋白质分离采用亲和液相色谱磁珠试剂盒,然后行基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱测定,经外校正后筛选差异表达多肽。选取部分多肽峰利用串联飞行时间质谱技术鉴定多肽。
结果:比较葡萄膜黑色素瘤患者术前组和正常对照组血清多肽谱的平均相对峰强度,发现差异表达多肽49种,其中上调33种,下调16种。根据受试者工作特征曲线发现14种差异表达多肽诊断效力较高,联合应用能提高分组灵敏度和特异度。分子量为1467和9289 Da的两个多肽联合运用的分组正确率为93%。葡萄膜黑色素瘤患者肿瘤切除后6月时,多个差异表达多肽的水平接近正常对照组。鉴定出两个差异表达多肽均为人纤维蛋白原α链的前体蛋白,在葡萄膜黑色素瘤患者术前血清标本中呈低表达。
结论:比较蛋白质组学技术分析和鉴定的葡萄膜黑色素瘤差异表达多肽有望成为肿瘤特异的标志物,联合应用这些差异表达多肽能提供较高的分组诊断效力,尚需进一步研究以阐释其作用机制和临床意义。磁珠蛋白分离和质谱测定结合的蛋白质组学技术平台提供了一个发现、筛选生物标志物的高效途径。 |