万磊 程钧 董晓光

　　山东省眼科研究所 266071

　　目的：观察小鼠视网膜新生血管发生过程中乙酰肝素酶(heparanase，HPA)的表达情况，探讨乙酰肝素酶对视网膜新生血管形成的作用。

　　方法：在高氧环境中制作C57BL/6J小鼠视网膜新生血管的动物模型。待小鼠出生后第12、13、17、21、30天摘除眼球，通过RT-PCR、Western blot方法检测HPA在视网膜中mRNA和蛋白水平的表达变化。正常空气环境中饲养的小鼠作为对照。在小鼠刚出氧箱即生后第12天行玻璃体腔注射HPA siRNA(1μg/μl)及相同浓度的对照质粒，5天后即生后第17天摘除眼球，Western blot方法检测视网膜中HPA在蛋白水平变化。并于上述不同时间点行视网膜伊文思蓝灌注铺片及视网膜组织病理切片观察视网膜新生血管的生长情况。

　　结果：RT-PCR及Western blot结果显示实验组小鼠HPA表达水平呈先升高后下降的趋势，生后第13、17、21天小鼠视网膜HPA mRNA水平显著高于正常对照组;生后第13、17、21、30在蛋白水平也显著高于正常对照组(P<0.05)。HPA的表达变化与视网膜新生血管的发生及发展明显相关。通过玻璃体腔注射HPA siRNA能显著减少视网膜组织中HPA在蛋白水平的表达，同时通过视网膜组织病理片观察到突破内界膜的视网膜新生血管内皮细胞的数量也明显减少(P<0.05)。

　　结论：在小鼠视网膜新生血管形成过程中，HPA发挥着重要作用。HPA可能是治疗视网膜新生血管性疾病的有用靶点，但安全性和有效性仍需进一步研究。