张静静 高华 刘廷 董晓光 王宜强
山东省眼科研究所 山东省眼科医院 250021
目的:观察内皮细胞迁移过程中细胞表型及细胞转型调控因子Twist的表达变化,探讨内皮细胞发生迁移的机理。
方法:体外培养EA.hy 926,细胞达到完全融合后用100μl微量移液头在24孔板内垂直划痕,宽度控制在500μm左右,继续培养8h、24h、72h。观察划痕内细胞形态变化,免疫荧光检测VE-钙黏蛋白、波形蛋白和细胞转型调控因子Twist表达变化。RT-PCR检测VE-钙黏蛋白、波形蛋白和Twist表达变化。
结果:8h迁移到划痕内细胞呈梭形,可见伪足,且波形蛋白和Twist表达增加,VE-钙黏蛋白表达减少,划痕外细胞则呈铺路石样,仅表达VE-钙黏蛋白,24h划痕内的梭形细胞增加,72h划痕内的细胞完全融合呈铺路石样,又仅表达VE-钙黏蛋白。
结论:划痕实验说明内皮细胞发生了间质转化,转化为间质细胞,从而获得了迁移的能力,并且这个过程是可逆的,同时,细胞转型调控因子Twist表达增加。内皮间质转化参与新生血管的形成,并且可能与细胞转型调控因子Twist的表达上调有关。 |