张湘 雷祥 刘月月 李根林

　　首都医科大学附属北京同仁医院眼科中心 北京市眼科学与视觉科学重点实验室 100067

　　目的：观察脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factors，BDNF)对体外培养的新生小牛视网膜细胞凋亡过程的作用，进一步明确BDNF对视网膜神经细胞的促存活效应，为BDNF治疗视网膜色素变性类疾病提供依据。

　　方法：以新生小牛视网膜传二代神经细胞作为研究对象，通过细胞计数法绘制细胞生长曲线，取对数生长期细胞进行免疫组化鉴定，将实验对象分为空白对照组和BDNF处理组(于细胞接种第3天加入终浓度为50ng/ml的BDNF)，于加药后第2、4、6天用Annexin-V-FITC/PI凋亡试剂盒对细胞进行荧光染色，用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。

　　结果：新生小牛视网膜细胞具有较强的增殖能力，经过2次传代后可获得较稳定的混合细胞培养物;细胞的对数生长期在3~7天，期间有缓慢增殖和快速增殖阶段;随着培养时间的延长，无论是对照组还是BDNF组，视网膜神经细胞均在营养剥夺和应激刺激下活性状态呈现下降趋势，BDNF在加药后第2天可明显抑制该凋亡进程，使细胞凋亡停滞于早期凋亡阶段，该效应在加药后4、6天仍然存在，但呈现逐渐减弱的趋势。

　　结论：BDNF可明显减缓视网膜神经细胞凋亡进程，尤其是在给药后的早期阶段，提示BDNF有望成为治疗退行性视网膜疾病的新型药物。