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Possible role of high-mobility group box 1 protein (HMGB1) in retinal diseases

http://www.cnophol.com 2009-6-22 11:09:15 中华眼科在线

Taiji Sakamoto  宋鄂  李芳  顾国贞  董宇  关小康  毕明超

Kagoshima University Graduate School of Medical and Dental Sciences, Japan

吉林大学第一医院眼科

应用培养的细胞在体外建立模型进行药物筛选,可以快速准确地筛选大量药物,是目前国际上新药筛选最主要的方法。

1. 工作条件包括相应设备及耗材,有关的知识与技能等,最主要的是需要有生长良好且稳定的细胞株。

2. 实验设计有药物直接作用试验(促细胞生长、抑制细胞生长或杀灭作用、细胞功能的表达等)或药物保护作用(对抗毒物)试验。按变量种类可分别测定剂量效应与时间效应。
3. 评价指标包括细胞数量,存活及死亡细胞数量,细胞功能的表达等。

4. 筛选方法有 MTT 试验、生长定量试验、凋亡测定、基因表达的RNA、蛋白及活力水平测定及信号途径研究等。每种方法均有其优缺点及适用对象。

5. 工作效率:美国国立癌症研究所用细胞培养技术筛选肿瘤药物,每星期可进行 120,000次试验,筛选 400种药物,全年可筛选20,000种药物。每种药物要测试 5 种浓度,60种不同肿瘤细胞,测试费用仅 200美元。在速度和节省费用上是动物实验无法比拟的。而且使用人类细胞,解决了动物实验无法克服的物种差异,使其结果更接近人类临床应用的结果。我室每个工作台每年也可筛选2500种药物/细胞株。当然,本法也有一定限制,如有些细胞还很难在体外培养以及体外与活体间的差异等。因此本法与动物实验和临床试验是相辅相成,不可偏废的。

6. 我们举出了近年来我室应用黑色素瘤细胞筛选抗肿瘤药物、应用血管内皮细胞筛选促进或抑制血管新生药物或是用视网膜色素上皮细胞和氧化损害模型(用过氧化氢、单氧或脂质氧化等造成损害)筛选抗氧化药物的实例,对用体外模型进行眼科新药筛选研究的各个具体问题进行说明。


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(来源:互联网)(责编:zhanghui)

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