有研究显示，大鼠视网膜缺血再灌注损伤后发生视网膜神经细胞凋亡，且凋亡在再灌注后6 h升 高， 24 h 达到高峰，之后有所下降[1，2]。凋亡是基因 介导的具有新的蛋白质合成的程序性死亡，细胞凋亡是级联式基因表达的结果。基因调控也在视网膜缺血再灌注损伤细胞凋亡中发挥关键作用[3]。细胞 内部的基因直接控制着凋亡的发生与发展，细胞外部因素通过信号传导而影响这些基因的表达，间接地调控细胞凋亡。目前已发现多种基因编码的产物参加了凋亡的控制，WTp53、bax和bcl-2为其中的重要成员，其中WTp53、bax为促凋亡基因，而bcl-2属于抑凋亡基因。体外实验和动物实验证实，神经细胞发生凋亡时伴随着WTp53基因高水平的表达[4，5]。应用WTp53基因的抑制物可防止细胞凋亡[6]，提示WTp53基因在神经细胞凋亡过程中起重要作用。国汉邦等[7]构建了含有WTp53基因的重组腺病毒载体，用此病毒感染胚胎大鼠神经细胞，观察神经细胞凋亡的发生，结果显示，WTp53基因导入可诱导神经细胞凋亡。本文应用免疫组织化学法检测显示，视网膜缺血再灌注后WTp53蛋白表达增加，主要位于神经节细胞层与神经纤维层。其表达规律为:再灌注后6 h开始表达，24 h达高峰，72 h明显减少，与牛膺筠等[2]研究结果相符。提示WTp53的过表达可能参与了视网膜神经节细胞凋亡的发生。bax基因位于染色体19q13.3-13.4，含有6个外显子，许多学者提出bax与bcl-2关系密切，而且bax是受p53调控的下游基因，在众多凋亡相关基因中，bcl-2、bax和p53之间的关系及其对凋亡的调控机制倍受关注。CHEN等[8]报道，bcl-2 mRNA阳性神经细胞再灌注后可延长存活时间，Bcl-2蛋白阳性表达的细胞存活;Bcl-2/Bax蛋白的比例决定细胞凋亡的趋势，Bcl-2/Bax的比例升高可抑制细胞的凋亡，反之，则可促进细胞凋亡;而bax与p53 mRNA阳性细胞随再灌注时间延长多趋于死亡，P53蛋白阳性表达的细胞多死亡。本文实验结果显示，视网膜Bax蛋白在缺血再灌注后6 h即有表达， 24 h达 到高峰，48 h开始下降，但仍维持较高的水平，至72 h明显减少。

　　与文献[2]研究结果相似。而bcl-2属抑凋亡基因，本实验中经缺血再灌注处理后各时间段Bcl-2蛋白表达无变化，也证实了在视网膜缺 血再灌注损伤中凋亡调控系统向促进凋亡方向发展。综上所述，视网膜缺血再灌注损伤后促凋亡基因WTp53和bax表达增加，而抑凋亡基因bcl-2的表达无明显变化。推测WTp53和bax可能通过诱导或促进神经节细胞凋亡参与了视网膜缺血再灌注损伤的发生。

　　[参考文献]

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　　[2] 牛 膺筠，张瑞，周占宇，等. 碱性成纤维细胞生长因子对鼠视网膜缺血再灌注损伤的治疗作用[J].中华眼科杂志，2002，38(9):530-534.

　　[3] 袁 春燕，赵颖. 碱性成纤维细胞生长因子与视网膜缺血再灌注损伤[J].青岛大学医学院学报，2003，39(2):216-217.

　　[4] WOOD K， YOULE R. The role of free radicals and P53 in neuron apoptosis in vivo [J]. Neurosci， 1995，15:5851-5857.

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　　[6] 蒋 雷，夏永静，黎健. 野生型P53基因导入对培养的兔血管平滑肌细胞生长的抑制作用[J].中华心血管病杂志，1997，25:301-304.

　　[7] 国 汉邦，黎健，董军，等. 野生型P53基因导入诱导神经细胞凋亡[J].中国神经免疫学和神经病学杂志，2002，9(1):92-95.

　　[8] CHEN J， GRAHAM S H， NAKAYAMA M， et al. Apopto-sis repressor gene bcl-2 and bcl-x lare express edintherat brain following globalis-chemia[J]. J Cereb Blood Flow Metab， 1997，17(1):1-10.

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