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3 讨论
PDR的病理机制是血—视网膜屏障的破坏及视网膜新生血管形成造成的玻璃体视网膜增生性改变。OPN是一种带负电荷的分泌性磷酸化糖蛋白,它具有钙结合域、凝血酶裂解位点、整合素以及RGD结合序列等多个功能结合区,可由多种组织细胞合成与分泌,其在许多系统疾病中被发现。OPN参与多种组织细胞损伤的修复过程,有促细胞移动、黏附和增生分化等功能,是一种增生相关蛋白[2]。在基因水平的研究[3]已经证实,OPN在增生相关性疾病中显著高表达,但在PDR中对OPN的临床研究目前还较少。动物研究[4]证实：OPN多存在于视网膜神经节细胞层,在其他视网膜层分布较弱。本研究测得PDR病例玻璃体液中OPN浓度为(883.39±151.12) ng·ml-1,较IMH组(非糖尿病) [(537.88±166.37) ng·ml-1]明显升高。另有研究[5]对PDR病例玻璃体液中OPN与血浆中OPN水平进行了比较,发现其浓度明显高于血浆,故非血眼屏障破坏等因素可以解释玻璃体液中OPN浓度高于血浆中OPN浓度,说明PDR病例玻璃体中的OPN可能由眼内产生,提示了OPN水平升高可能在增生性糖尿病视网膜病变的病理过程中起了一定的作用。Chidlow等[4]以兴奋性中毒和局部缺血损伤后的小鼠模型视网膜进行了OPN表达的时间和定位检测,通过mRNA分析和免疫组织化学的方法发现,在模型眼中出现了OPN mRNA上调,具体产生的细胞尚不明确,增高的OPN通过RGD序列和与视网膜血管内皮细胞的整合素受体结合后引起聚集黏附激酶(FAK)磷酸化,通过Grb2/SOS或FAK/Src激活Ras、MAPK途径,调节细胞骨架蛋白组装，细胞的聚集、黏附，血管内皮细胞增生和视网膜新生血管的生成。
血管源性因子是导致糖尿病视网膜细胞异常增生和新生血管生成的主要原因。前期研究[6]揭示,VEGF及其受体在正常角膜各层均有表达,但表达量很低,而在眼部一些疾病中则高表达,能促使内皮细胞的增生、迁移,蛋白水解和病理性血管生成。VEGF能特异性作用于视网膜血管内皮细胞,是最直接的眼内新生血管形成因子。大量临床研究[7]显示,DR患者玻璃体和视网膜VEGF水平升高,且随着DR严重程度的增加,VEGF相应增多,其受体水平也随之升高。缺氧可诱导视网膜细胞内缺氧诱导因子1(hypoxia inducible factorl,HIF1)的活性增强,上调VEGF等血管形成因子的表达,产生的VEGF通过与其特异性受体结合激活其下游的一系列蛋白,如激活磷脂酶C,水解磷脂酰肌醇二磷酸,产生二脂酰甘油DAG和肌醇三磷酸IP3,DAG可激活胞浆内蛋白激酶C,进而启动细胞内系统,主要对毛细血管后静脉和小静脉施加影响,增加其通透性,可使血液中的大分子物质进入细胞外基质中,形成纤维蛋白凝胶等,有利于新生血管和基质细胞生长[8]。同时VEGF还可以诱导蛋白水解酶、组织因子、基质胶原酶等在内皮细胞的表达,激活第Ⅶ因子从内皮细胞释放,改变细胞外基质(ECM),介导内皮细胞迁移和浸润,以利于血管生成[9]。反面证据是向鼠眼内注入VEGF受体Flt或Flk拮抗剂,可分别使视网膜新生血管形成减少100%和95%[10]。在本研究中,PDR患者玻璃体VEGF的平均含量[(1 158.68±140.98) pg·ml-1]明显高于对照组(IMH组)的[(295.91±109.62) pg·ml-1],与国外报道一致。通过VEGF平均浓度的比较更直接地反映了新生血管活动性的水平,验证了VEGF在PDR的发生、发展中起着重要作用。
本实验统计分析表明,玻璃体液的OPN与VEGF含量呈显著正相关(r=0.69,P<0.01)。Shijubo等[11]研究证实,在肿瘤生成的病理机制中VEGF能诱导OPN水平升高，进一步导致上皮细胞迁移,使新生血管生成促进肿瘤生长和转移,但具体机制尚不清楚。因此,我们推测,在PDR患者由视网膜微循环缺氧作为始动因素,导致OPN和VEGF水平上调,两者作用于视网膜血管内皮细胞不同的受体,通过不同的途径共同促进病理性视网膜新生血管的形成。
综上所述,我们的研究结果提示,OPN和VEGF共同参与PDR患者病理性新生血管的形成过程。但由于PDR形成涉及多种因子,可能存在多条影响途径,故其具体增生机制仍是困扰人们的一个难题。病理情况下OPN的分布,何种视网膜细胞分泌来源,OPN分泌与病程时间、相关细胞因子之间的关系以及OPN发挥生理功能的具体通路,何种药物能够减少OPN的生成等仍不清楚,需要我们今后进一步的研究来明确,为PDR的预防和治疗引入新的有效思路和方法。
【参考文献】
[1] 陈萍,赵炜,王楠,等.糖尿病视网膜病变荧光造影临床分析[J].国际眼科杂志,2007,7(3):863864.
[2] DENHARDT D T,GUO X J.Osteopontin：a protein with diverse functions[J].FASEB,1993,7(12):14751482.
[3] TAKAGI H,SUZUMA K,OTANI A,et al.Role of vitronectin receptor type integrins and osteopontin in ischemiainduced retinal neovascularization[J].Jpn Ophthalmol,2002,46:270
278.
[4] CHIDLOW G,WOOD J P, MANAVIS J,et al.Expression of osteopontin in the rat retina:effects of excitotoxic and ischemic injuries[J].Invest Ophthalmol Vis Sci,2008,49(2):762771.
[5] KASE S,YOKOI M,SAITO W,et al.Increased osteopontin levels in the vitreous of patients with diabetic retinopathy[J].Ophthalmic Res.2007,39：143147.
[6] SAISHIN Y,SAISHIN Y,TAKAHASHI K,et al.VEGFTRAP(R1R2) suppresses choroidal neovascularization and VEGFinduced breakdown of the bloodretinal barrier[J].Cell Physiol,2003,195(2):241248.
[7] SHAMS N,IANCHULEV T.Role of vascular endothelial growth factor in ocular angiogenesis[J].Ophthalmol Clin North Am,2006,19(3):335344.
[8] ARJAMAA O,NIKINMAA M.Oxygendependent diseases in the retina: role of hypoxiainducible factors[J].Exp Eye Res.2006,83(3):473483.
[9] 胡建斌,陈大年.增生性玻璃体视网膜病变玻璃体血管内皮生长因子的表达[J].中华眼科杂志,2000,36(5):388389.
[10] AIELLO L P,PIERCE E A,FOLEY E D,et al.Suppression of retinal neovascularization in vivo by inhibition of vascular endothelial growth factor (VEGF) using soluble VEGFreceptor chimeric proteins[J].Proc Natl Acad Sci USA,1995,92(23):1045710461.
[11] SHIJUBO N,UEDE T,KON S,et al.Vascular endothelial growth factor and osteopontin in tumor biology[J].Crit Rev Oncog,2000,11：135146. 上一页 [1] [2] |
