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2结果
2.1基础泪液分泌量比较
空白组SⅠt测量值比较,经方差分析，A1,A2,A3各组之间均无显著性差异，以及经自身前后配对t检验，各组生理盐水滴眼前后，大鼠SⅠt均无显著性差异。模型组(B1,B2,B3)SⅠt测量值比较：经自身前后配对t检验，雄鼠模型组去势后1,2,3mo后基础泪液分泌量明显减少，滤纸湿长缩短，与去势前有明显差异(P<0.01)，另外经方差分析，与B1组去势1mo后基础泪液分泌量比较，去势2mo和去势3mo的B2,B3组泪腺分泌量要更低(P<0.05，P<0.01)，可见去势后，泪腺的基础分泌量随着时间的增长而降低。治疗组SⅠt测量值比较,雄鼠去势后经密蒙花提取物滴眼剂治疗后，经方差分析，C1,C2,C3各组之间均无显著性差异，以及经自身前后配对t检验，各组滴眼前后，大鼠SⅠt均无显著性差异，表明密蒙花提取物滴眼剂能够较好地维持泪液基础分泌量。治疗后治疗组与模型组(C1与B1,C2与B2,C3与B3)SⅠt测量值比较：以滴眼前的试纸湿长为协变量，经协方差分析，C1,C2,C3组去势后经密蒙花提取物滴眼剂治疗，基础泪液分泌量增加，滤纸湿长与相应的模型组B1,B2,B3组比较增长明显(P<0.01，表1)。表1大鼠各组治疗前后SⅠt测量值(略)
2.2泪膜稳定性比较
大鼠各组BUT测量值见表2。空白组BUT测量值比较，经方差分析，A1，A2，A3各组之间均无显著性差异，以及经自身前后配对t检验，各组生理盐水滴眼前后，大鼠BUT均无显著性差异。模型组(B1，B2，B3)BUT测量值比较，经自身前后配对t检验，雄鼠模型组去势后1，2，3mo后泪膜稳定性明显下降，泪膜破裂时间明显缩短，与去势前有明显差异(P<0.01)，另外经方差分析，与B1组去势1mo后泪膜稳定性比较，去势3mo的B3组的泪膜破裂时间要更低(P< 0.05)，可见去势后，泪膜稳定性随着时间的增长而逐渐呈现降低的趋势。治疗组BUT测量值比较，雄鼠去势后经密蒙花提取物滴眼剂治疗后，经方差分析，C1，C2，C3各组之间BUT测量值均无显著性差异，以及经自身前后配对t检验，各组滴眼前后，大鼠BUT均无显著性差异，表明密蒙花提取物滴眼剂能够较好地维持泪膜稳定性。治疗后治疗组与模型组(C1与B1，C2与B2，C3与B3)BUT测量值比较，以滴眼前的泪膜破裂时间为协变量，经协方差分析，C1，C2，C3组去势后经密蒙花提取物滴眼剂治疗，泪膜稳定性增加，泪膜破裂时间与相应的模型组B1，B2，B3组比增长明显(P<0.01)，另外经方差分析，与C1组去势治疗1mo后泪膜稳定性比较，去势治疗3mo的C3组的泪膜破裂时间要相对较低(P< 0.05)，可见去势后，密蒙花提取物滴眼剂维持泪膜稳定性的能力，随着时间的增长而逐渐呈现降低的趋势。表2大鼠各组治疗前后BUT测量值(略) 表3各组治疗后Bax和Bcl2表达及细胞凋亡数的变化(略)
2.3泪腺细胞凋亡比较
各组细胞凋亡数量的比较：模型组(B1,B2,B3组)去势后1,2,3mo后细胞凋亡明显增强，泪腺腺泡和导管上皮中均可见散在的阳性凋亡细胞，平均每高倍视野45.4±9.3和58.2±10.3和70.4±11.7)个，经方差分析，与相应空白组(A1，A2，A3组)比较有明显差异(P<0.01);另外经方差分析，与B1组比较，B3组的细胞凋亡数量要更多(P<0.05)。光镜下可见凋亡细胞核呈棕黄色，有的细胞核中染色物质集中于核膜下呈不规则环形或半月形，有的可见分裂的细胞核。C1，C2，C3组去势后经密蒙花提取物滴眼剂治疗1，2，3mo，细胞凋亡缓解，C1，C2，C3组平均每高倍视野12.8±7.9和21.3±8.9和31.9±6.7)个，经方差分析，与相应模型组(B1，B2，B3组)比较有明显差异(P<0.01,表3)。凋亡相关基因蛋白Bax及Bcl2的表达：采用电子计算机图像分析技术检测各组泪腺细胞Bax及Bcl2染色的平均吸光度值。大鼠各组治疗后Bax和Bcl2平均吸光度测量值见表3。结果表明空白组(A1，A2，A3)Bax及Bcl2的表达均不明显。模型组(B1，B2，B3)去势后1，2，3mo，均可见Bax大量表达于细胞膜和细胞质中，呈棕黄色颗粒，而Bcl2表达不明显。治疗组(C1，C2，C3)经密蒙花提取物滴眼剂治疗后，Bcl2表达增强，可见其大量表达于细胞膜和细胞质中，呈棕黄色颗粒，Bax表达较相应模型组减弱。
3讨论
干眼症暂无确切的中医病名，根据其症状，轻症可归属于“白涩症”，重症可归属于“神水将枯”、“外障翳症”的范畴。而雄激素水平下降所致干眼症常属于重症干眼症，应归属于“神水将枯”的范畴，“外障翳症”则是其病程转归的不良结果。《秘传眼科龙木论》论：“目涩者何也?答曰：此乃熏脏腑也。……液道枯干，脏腑邪热传于卫，真气不荣于目，故目涩也。”可见 “神水将枯”病理机制为内因在脏腑之邪热伤阴液，邪热传于卫表则为风热。而《素问·宣明五气篇》说：“五脏化液，肝为泪”，《银海精微》说：“泪乃肝之液”，可见“神水将枯”所病脏腑在肝，所以治疗原则应该在内清肝热、养肝阴，在外清卫表风热。密蒙花既能清肝，又能养肝，为厥阴肝经之正药[2]。《银海精微·药性论》曰：“密蒙花，……，入肝经，能明目。”所收录代表方剂为密蒙花散，以密蒙花为君药。《银海精微·卷之下》说：“密蒙花散：治久患内外障翳，羞明怕日，……风热气障等病皆治之。”《秘传眼科龙木论》有其治疗眼表干燥的论述：“密蒙花散：治风气攻注，两眼昏暗，眵多羞明。睑生风栗，隐涩难开，或痒或痛，……昏涩隐疼，并暴赤肿疼皆治之。”可见密蒙花在内可清肝之积热，滋肝之阴液，在外清卫表风热，恰中干眼症中医病因病机，拥有中医理论依据，为治疗干眼症的理想药物，成为其治疗干眼症的一大优势。
3.1密蒙花提取物治疗干眼症的可能机制
雄激素、黄酮均为杂环多酚类化合物，可以利用其化学结构的相似性，与AR结合。目前研究已证明某些黄酮类化合物具有拟雄激素作用[3]，可以用于治疗因雄激素水平下降所致的某些疾病[4]。利用放射性示踪标记的方法研究还表明黄酮是细胞AR的刺激物，可以与细胞AR结合发挥生物学效应[5]。已有研究证明在密蒙花花蕾中可分离得到8个黄酮类化合物，密蒙花中所含黄酮也应可与AR结合，产生拟雄激素效应，治疗雄激素水平下降导致的疾病，自然也可包括干眼症，其可能在治疗性激素水平下降导致干眼症方面起到独到的效果[610]。符合干眼症西医病因病理，拥有西医理论依据。密蒙花所含黄酮可作为治疗干眼症理想的雄激素替代药物，成为其治疗干眼症的另一大优势。
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