作者：洪伟，刘庆淮，谢平

　　【摘要】 目的  研究儿童外伤性白内障晶状体上皮细胞的线粒体形态变化。 方法  用日本产AEM-1200型透射电镜对10例儿童外伤性白内障及正常晶状体上皮细胞的线粒体进行观察。用计算机图像分析系统计算线粒体的体积密度。 结果  儿童外伤性白内障晶状体上皮细胞与正常对照组相比线粒体肿胀、变空非常明显，嵴变形扭曲且大量减少或消失，呈现空泡化，内膜和外膜均有破损。两组线粒体的体积密度差异有显著性（P<0.05）。 结论  儿童外伤性白内障晶状体上皮细胞的线粒体病理学改变与白内障的发生发展密切相关。

　　【关键词】  儿童;白内障
    
　　Morphology observation of the filament of the lens epithelial cells in the traumatic cataract in children

　　HONG Wei，LIU Qing-huai，XIE Ping.

　　Department of Ophthalmology，The First Affiliated Hos-pital of Nanjing Medical University，Nanjing 210029，China
   
　　【Abstract】 Objective To observe the morphology change of the filament of the lens epithelial cells in the traumatic cataract in children.Methods The filament of LECs of traumatic cataract（10cases）in children and filament of normal lens were observed by AEM-1200type electron microscope.The fila-ment of LECs in the two groups were caculated with computer image analysis system.Results In the traumatic cataract，the filament of LECs swelled and emptied obviously，the cristaes were deformated and distorted，and significantly reduced，disappear and emptied.The inside membrane and the outside membrane of the filament were damaged.There was significant difference in Vv between the two groups（P<0.05）.Conclusions The morphology change of the filament of the lens epithelial cells may play a critic role in pathogenesis of the traumatic cataract in children.
   
　　【Key words】 Children;Cataract （Chin J Dis Control Prev2006，10（3）:292-294）
  
　　白内障是一种世界性的致盲眼病，对其发病机理的研究一直是眼科界研究和探讨的热点，研究清楚晶状体上皮细胞的凋亡机理成为研究各型白内障形成机理的一个重点，笔者于2005年对10例儿童外伤性白内障晶状体上皮细胞（lens epithelial cells，LECs）的线粒体进行了观察，现报道如下。
    
　　1 对象与方法
   
　　1.1 调查对象与分组 

　　病例组:10例病人共10只眼标本，是2005年在南京医科大学第一附属医院住院的儿童外伤性白内障患者的晶体前囊膜，其中男8例，女2例，平均年龄为10.2岁，受伤时间1d～3a不等。10例标本，共计80张随机拍摄的电镜照片。对照组:因透明晶体摘除的手术病人极少，所以正常透明晶体的前囊膜只取到2例4只眼，共计32张随机拍摄的电镜照片。
    
　　1.2 主要实验仪器 

　　裂隙灯显微镜:由苏州医疗器械厂生产;眼科手术显微镜:TOPCON-610型手术显微镜（Japan）;透射电子显微镜:AEM-1200型透射电子显微镜（Japan）。
    
　　1.3 实验方法 

　　晶体摘除术中，手术显微镜下用撕囊镊小心撕取晶状体前囊膜，直径约6mm。室温下立即置于4%戊二醛溶液中固定24h后，用磷酸盐缓冲液（pH=7.4）冲洗，1%锇酸固定l h再冲洗，梯度乙醇脱水，环氧树脂618包埋制成透射电镜标本，切片后用铀-铅双重金属染色，透射电镜下观察其超微结构并记录。透射电子显微镜:观察晶状体上皮细胞超微结构观察，并与对照组对比。每个晶体前囊膜分别观察2个铜网，每个铜网由左上角至右下角斜线上下运动随机拍摄4张，共8张，电镜照片最终放大20000倍（照片大小为95mm×63mm）。
    
　　1.4 体视学定量分析
    
　　1.4.1 测试方法 

　　所有电镜照片选用彩色图像摄录输入仪（JVC ky-F30B3-CCD，JAPAN）和图像分析系统（KONTRON IBAS2.0GERMEN）进行形态计量分析。把照片放在JVC摄像机下径标定的面板上，对照片摄像并输入至计算机的监视器的屏幕上，然后在交互式操作方式下随机对目标进行测试 ［1］ 。同时在监视器上观察线粒体形态、分布特征的变化。图像数据结果贮存于图像分析系统，然后进行统计学分析。
    
　　1.4.2 测试项目和定量参数

　　所有的照片均是在相同的参照系面积（Ar=5985mm 2 ）下进行处理，
   
　　由图像分析系统可以得出每张照片的线粒体的截面 数目、线粒体的所有截面的总周长及其总面积。然后按照体视学的原理 ［2，3］ 选定定量参数:体密度（volume density，Vv），计算公式如下:
    Vv=Ax/Ar=∑n i=1 Axi/∑n i=1 Ari
   
　　其中i表示照片数，Axi表示第i张照片上X相的截面面积，Ari表示第i张照片上参照系的截面面积。
    
　　1.4.3 统计学处理 

　　测定结果数值采用均数±标准差（x±s）来表示，利用SPSS10.0统计软件，由计算机进行统计处理，进行单因素方差分析，方差齐性时用LSD或Student-Newman-Keuls检验进行比较，方差不齐时用Tamhane's T2检验，以α=0.05为检验水准。

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