精彩推荐:青光眼 白内障 近视 远视 散光 斜视弱视 角膜溃疡 角膜炎 沙眼 眼外伤 更多疾病
大众频道
专业频道
时尚频道
互动频道
疾 病 | 保 健 | 爱眼动态 | 名医名院
知 识 | 美 食 | 自检自测 | 爱眼纪事
资 讯 | 临 床 | 学 术 | 文 献
图 谱 | 医 患 | 继 教 | 家 园
五官之美 | 整 形 | 美 容
眼镜一族 | 妆 容 | 图 库
眼科在线 | 预留位置
眼科知道 | 在线咨询
  当前位置:当前位置: 中华眼科在线 → 医学频道 → 前沿动态 → 研究进展 → 正文 切换到繁體中文 用户登录 新用户注册
气相色谱法测定β-榄香烯在兔眼内的分布

http://www.cnophol.com 2009-7-23 10:45:33 中华眼科在线

  气相色谱法测定β-榄香烯在兔眼内的分布

  眼科研究 2000年第4期第18卷 实验研究

  作者:郭彤 张惠蓉 接传红 邹安庆 杨彬

  单位:郭彤 张惠蓉(100083北京医科大学第三临床医学院眼科);接传红(中国中医研究院眼科医院);邹安庆(北京医科大学国家重点实验室);杨彬(北京医科大学医药卫生分析中心)

  关键词:气相色谱法;榄香烯;眼球

  摘要 目的测定正常兔眼球后注射榄香烯后药物在眼内的分布。方法采用气相色谱法测定正常兔眼单次及连续1周球后注射榄香烯后房水、玻璃体、视网膜和脉络膜中β-榄香烯的浓度。结果单次球后注射榄香烯后1h,房水、玻璃体、视网膜和脉络膜中均检测到β-榄香烯。连续1周注射后,仅视网膜和脉络膜中检测到β-榄香烯,浓度与单次注射相比无明显增加。结论正常兔眼球后注射榄香烯可通过血-视网膜屏障进入眼内,连续用药后无明显蓄积作用。

  分类号 R988.1

  Determination of the distribution of β-elemene in rabbit eyes by gas chromatography

  Guo Tong Zhang Huirong Jie Chuanhong et al.

  (Department of Ophthalmology,the Third Clinical Medical School of Beijing Medical University,Beijing 100083)

  Abstract ObjectiveTo determine the distribution of β-elemene in normal rabbit eyes after single and repeated retrobulbar injections.MethodsElemene was injected into the retrobulbar space of normal rabbit eyes at a dose of 5mg.Besides single injection,repeated injections were also performed once a d for one week.Aqueous and vitreous were collected.Retinas and choroids were dissected off and reduced to pulp separately.The concentration of β-elemene in these four compartments were measured by gas chromatography.Resultsβ-elemene was found in aqueous,vitreous,retina and choroid 1h after single retrobulbar injection.The concentrations of β-elemene in these four compartments decreased in the following order:choroid>retina>vitreous>aqueous.After repeated retrobulbar injections for one week,however,β-elemene was found only in retina and choroid,and the concentration of β-elemene in retina was higher than that in choroid.It was also found that the β-elemene concentration in retina after repeated injections was not significantly different in comparison with that after single injection,whereas β-elemene concentration in choroid decreased markedly.ConclusionElemene can pass the blood-retinal barrier of normal rabbit eye after retrobulbar injection and does not accumulate significantly after one week of repeated injections,implying that elemene has potential value in ophthalmic therapy.

  Key words gas chromatography elemene eye

  视网膜新生血管形成是眼科常见的致盲性病变,目前尚无理想的治疗手段。因此,寻找能有效抑制视网膜新生血管形成的药物具有重要的临床意义。

  榄香烯(elemene)是从中药温莪术中提取的倍半萜烯类化合物,主要成分为β-榄香烯,是我国自行研制的非细胞毒性抗肿瘤药物,对多种肿瘤细胞具有抑制作用。我们的研究表明,榄香烯对体外培养视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cell,RPE)的增殖具有抑制作用(待发表),而RPE在视网膜新生血作者单位:100083北京医科大学第三临床医学院眼科(郭彤、张惠蓉);中国中医研究院眼科医院(接传红);北京医科大学国家重点实验室(邹安庆);北京医科大学医药卫生分析中心(杨彬)管形成过程中的重要作用已为大量研究所证实[1]。这一结果提示,榄香烯有可能作为一种抗增殖药物用于视网膜新生血管的防治。

  为了解榄香烯在眼部应用的可能性,我们采用气相色谱法对正常兔眼球后注射榄香烯后药物的眼内分布进行了初步研究。

  1 材料与方法

  1.1 主要材料与设备

  新西兰白兔(北京医科大学实验动物中心提供)。

  0.5%榄香烯乳剂;β-榄香烯标准品,纯度99.0%(大连金港制药有限公司惠赠)。

  正十六烷,色谱纯(上海试剂一厂)。

  日本津岛GC-9A型气相色谱仪,C-3A型数据处理机。

  1.2 实验方法

  1.2.1 单次球后注射榄香烯后样品的制备

  选取健康雄性新西兰白兔,体重约2.5kg,眼部无病变。球后注射榄香烯5mg,对照组注射等体积生理盐水。1h后处死动物,抽取房水和玻璃体;分离视网膜和脉络膜,分别称重后按1∶ 3加入生理盐水,制备匀浆。-20℃保存。

  1.2.2 连续多次球后注射榄香烯后样品的制备

  按上述方法,每日球后注射榄香烯5mg,对照组注射等体积生理盐水,连续给药1周,最后一次给药后24h处死动物,制备样品。

  1.2.3 样品测定

  将房水、玻璃体、视网膜和脉络膜的匀浆液离心(3000r/min)10min,取上清液50μl,加入正十六烷内标液(1.0μl/ml无水乙醇溶液)2.5μl,混匀,进样检测。

  色谱条件:参照侯丽娟、王G88D2等的方法加以改进[2,3],色谱柱为30m×0.25mm×0.25μm石英毛细管柱,固定相5%SE-54,柱温170℃,气化室温度240℃,检测器FID,气体流速:高纯N2 20ml/min,H2 60ml/min,Air 600ml/min,进样量0.3μl,分流比20∶ 1,纸速5mm/min。

  1.2.4 β-榄香烯标准曲线的制备

  将β-榄香烯标准品用无水乙醇配制成浓度分别为0.5,1.0,2.0,4.0,6.0μg/ml的标准系列,各取50μl,加入正十六烷内标液2.5μl,混匀后进样检测,以不同浓度的β-榄香烯峰高与内标峰高之比对相应浓度进行线性回归计算。

  2 结果

  2.1 标准曲线的线性范围

  β-榄香烯在标准曲线浓度范围内的线性关系良好,回归方程为Y=0.139X-0.0014,相关系数r=0.9999。色谱图见图1(A)。

  2.2 榄香烯在兔眼内的分布

  单次球后注射榄香烯1h后,房水、玻璃体、视网膜和脉络膜中均可检测到β-榄香烯,色谱图见图1(B)。脉络膜中浓度>视网膜>玻璃体>房水,房水中的浓度低于线性范围的下限。空白对照组房水、玻璃体、视网膜和脉络膜中均未检测到β-榄香烯,色谱图见图1(C)。

  图1 色谱图 Fig.1 Chromatograph

  连续1周球后注射榄香烯,最后一次给药后24h检测,仅在视网膜和脉络膜中测出β-榄香烯,且视网膜中的浓度高于脉络膜。而房水和玻璃体中均未测出。与单次注射相比,β-榄香烯在视网膜中的浓度无明显差异(P>0.05),而在脉络膜中的浓度明显降低(P<0.05),见表1。

  *Concentration is below the lower limit of the detectable range

  3 讨论

  榄香烯(elemene)是从中药温莪术挥发油中提取的倍半萜烯类化合物,主要有效成分为β-榄香烯,化学名为1-甲基-1-乙烯基-2,4-二异丙基环己烷,分子式:C15H24,相对分子质量204,是我国自行研制的非细胞毒性抗肿瘤药物。该药在血浆中呈二室模型分布,t1/2α=11.2min,t1/2β=10.5h。药物主要分布于肺、脾、淋巴结等组织,可通过血脑屏障进入脑组织。大量研究表明,该药在体内、外均对多种肿瘤细胞具有抑制作用,且不良反应小,对肝肾功能无明显损害,无骨髓抑制,是一种较有前景的抗癌药物[4]。我们的研究还表明,榄香烯具有抑制体外培养RPE细胞增殖的作用,有可能作为一种抗增殖药物用于视网膜新生血管的防治。

  本实验显示,健康兔眼球后注射榄香烯,可通过血-视网膜屏障进入眼内,单次注射后1h,房水、玻璃体、视网膜、脉络膜中均可检测到β-榄香烯。连续注射1周,最后一次给药后24h检测,仅在视网膜和脉络膜中测出β-榄香烯,且在视网膜中的浓度高于脉络膜。与单次注射相比,β-榄香烯在视网膜中的浓度无明显差异,而在脉络膜中的浓度明显降低。说明长期使用后药物分布集中于视网膜和脉络膜,且无明显蓄积作用。榄香烯的眼内分布特点,有利于其作为一种抗增殖药物用于视网膜新生血管的防治。

  采用气相色谱法可对组织中的榄香烯直接进行定量分析,具有方法简单,速度快,灵敏度高,选择性好,样品用量少等优点,是一种较理想的方法。

  参考文献

  1,Kishi H,Mishima HK,Yamashita U,et al.Growth regulation of retinal pigment epithelial (RPE) cells in vitro.Gurr Eye Res,1994,13∶ 661

  2,侯丽娟,廉晓红,陈玉仁.气相色谱法测定榄香烯含量.色谱,1996,14(5)∶ 118

  3,王G88D2,苏成业.气相色谱法测定生物样品中β-榄香烯.药物分析杂志,1998,18(6)∶ 394

  4,钱军.抗癌新药——榄香烯的药理及临床.中国肿瘤临床,1996,23(6)∶ 453

(来源:互联网)(责编:xhhdm)

发表评论】【加入收藏】【告诉好友】【打印此文】【关闭窗口
  • 下一条信息: 没有了
  • 更多关于(眼睛,中华眼科在线,眼科,气相色谱法,榄香烯,眼球)的信息
      热门图文

    养出“媚眼”的七种对

    彩虹萤光眼妆缔造闪亮

    明眸光彩由SPA"眼"义

    眼部瑜伽除掉细纹黑眼
      健康新看点
      健康多视点
    ad推广
      图话健康
    点击申请点击申请点击申请点击申请
    中国视力网中国眼网眼镜人久久眼科网华夏健康网健康863保健阿里医药眼科网首席医学网浙江眼科网
    点击申请点击申请点击申请点击申请点击申请点击申请点击申请点击申请点击申请点击申请

    Copyright © 2007 中华眼科在线 网站备案序列号: 京ICP备08009675号
    本网站由五景药业主办 北京金鼎盛世医学传媒机构负责运营 国家医学教育发展中心提供学术支持
    服务电话:010-63330565 服务邮箱: [email protected]