角膜结膜及泪器病             1513                                      PO0264

　　人皮肤干细胞横向诱导分化为类结膜上皮细胞生物学特性检测的实验研究

　　孟繁剑  陈家祺

　　广州中山眼科中心 510060

　　目的：检测经诱导分化后的类结膜上皮细胞中β-2-microglobulin、 keratin13 基因的表达及人工结膜组织中特异性蛋白（CK13、MUC5AC)的表达情况。

　　方法：试验组细胞以结膜上皮细胞为饲养细胞进行共培养，并设立空白对照组细胞培养相同时间，分别于第1、3、5、7日取各组细胞提取RNA进行实时RT-PCR定量检测各组β-2-microglobulin、 keratin13 基因的表达情况；并用免疫印记的方法检测体外构建人工结膜组织膜中是否有结膜特异性CK13及MUC5AC蛋白的表达。

　　结果：试验组细胞共培养3天后出现β-2-microglobulin、 keratin13基因的表达，5、7天的表达量显著提高；经体外构建10天、20天的人工结膜都有与正常结膜组织相同的CK13和MUC5AC蛋白的表达。

　　结论：经本实验方法构建的人工结膜组织膜具有与正常结膜组织相似的分子生物学特性。
　
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