眼视光学杂志 1999年第4期第1卷 论著
作者：李文生 牟奇芸 曾令柏 李含玉 王家翠 黄琛
单位：湖南医科大学附二医院眼科（李文生）；昆明医学院第一附属医院眼科（牟奇芸 曾令柏 李含玉）；昆明医学院第一附属医院实验中心（王家翠 黄琛）
关键词：白内障；血；房水；晶体；抗氧化酶
摘 要 目的：探讨老年性白内障患者血、房水、晶体中的抗氧化酶对晶体的保护作用。方法：用黄嘌呤氧化酶法和改进的还原型谷胱甘肽消耗法分别测定40例老年性白内障患者的血、房水和晶体中的抗氧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX并与20只实验犬作对照。结果：实验组血中SOD和GSH-PX活性明显高于实验组房水和晶体中二者的活性，GSH-PX在血-房水和血-晶体中活性差异有显著性意义(q检验，P＜0.01)；SOD在三者中活性差异无显著性意义(F检验，P＞0.05)；对照组房水和晶体SOD明显高于血中，并在对照组的血、房水、晶体中其活性差异有显著性意义(q检验，P＜0.01)，对照组血和房水中GSH-PX活性明显高于晶体中，并且GSH-PX在三者中其活性差异有显著性意义(q检验，P＜0.01)。结论：在房水和晶体中SOD和GSH-PX活性的下降是形成老年性白内障的原因之一。
Study on antioxidases in the blood,aqueous humor
and lenses of senile cataracts
Li Wensheng,Mou Qiyun,Zeng Lingbai,et al.Deportment of Ophthalmology,the Second affiliated Hospital of Hunan Medical University,Changsha 410011
Abstract Objective:To investigate the antioxidases in the blood,aqueous humor and lenses of senile cataracts.The antioxidases act as a protective agent for the lens.Methods:The activity of superoxide dismutase (SOD) was measured with the xanthine oxidase method and glutathione-peroxide(GSH-PX) activity was measured with modified glutathione exhaustion assay in the blood,aqueous humor and lenses of forty dogs with senile cataracts and twenty normal dogs.Results:In the catractous group,the activity of SOD and GSH-PX in the blood was remarkably higher than for that t in the aqueous humor and lens.(q-test,P (less than) 0.01).There was a statistically significant difference in GSH-PX activity in the blood and lens (q-test,P(less than) 0.01) between the 2 groups.The activity of SOD in the aqueous humor and lenses of the senile cataracts was remarkably higher than that in the blood of the control group.There was a statistically significant difference in GSH-PX activity (q-test,P (less than) 0.01) in the aquous humor and lens of the control group compared to the senile cataracts.Conclusion:Decreased activity of SOD and GPX in the aqueous humor and lens was one of the causes of cataractogenesis.
Key words Cataract Blood Aqueous humor Lens Antioxidase
老年性白内障发病机理十分复杂，目前尚未完全明了。目前多数学者认为：晶体混浊是一系列复杂过程的最后阶段，其中氧化损伤是其形成的最初因素［1］。本实验测定了老年性白内障患者血、房水、晶体中的抗氧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)，探讨其在老年性白内障形成过程中的作用。
1 材料和方法
1.1 试剂与仪器 SOD、GSH-PX试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。721可见光分光光度计，离心机，37℃恒温水浴箱，玻璃匀浆器均为上海医疗器械厂生产。
1.2 材料 实验组受试对象40例，男23例，女17例，年龄52～83岁，平均67.7岁。全部病人均检查确诊为老年性白内障的近成熟期或成熟期的住院患者。所有患者空腹血糖、血压、肝、肾功能测定均正常，眼部无外伤、炎症及高度近视等病史。术前取空腹肘前抗凝静脉血和全血，分别为3ml及2.5ml。术中完成角膜缘板层切口后，用1ml注射器抽取房水约0.2ml，随即进行囊内摘除晶体，滤纸吸干后称重，上述标本在4℃冰箱内保存，12小时内完成各项指标测定。对照组选用体重8～12kg健康成年杂种犬20只，雌雄不限，均由昆明医学院第二附属医院动物科提供。取材同实验组。但取出晶体均在裂隙灯显微镜下证实透明完整。在取材过程中，有4眼实验组的房水以及对照组的16眼房水及10眼晶体取材失败。
1.3 SOD和GSH-PX的测定
1.3.1 SOD用黄嘌呤氧化酶法测定其活力高低：①取新鲜血清、房水、晶体匀浆液各0.003ml；②充分混匀置37℃恒温箱中水浴40分钟；③与2ml显色剂混匀，10分钟后倒入1cm光径比色杯中，蒸馏水调零；④波长550nm处比色计算SOD值。
SOD=(对照管吸光度-测定管吸光度)÷对照管吸光度÷0.5×样品稀释倍数，单位：U。
1.3.2 GSH-PX采用改进的还原型谷胱甘肽(GSH)消耗法：①取血浆、房水、晶体匀浆液各0.02ml，用水稀释到1ml(1∶50溶液)，再取0.4ml 37℃水浴准确反应5分钟；②加2号试剂4ml混匀，3500～4000r/min离心10分钟；③混匀后蒸馏水或空白管调零，420nm处1cm光径比色计算。
GSH-PX=(非酶管OD-样品管OD)×A×5÷3min×样品蛋白质的毫克数，单位：U。A=标准GSH浓度÷标准GSH吸光度OD值。
1.4 统计学处理 将以上所得数据输入计算机SPSS软件进行处理。计算各组参数均值和标准差，经正态检验和方差齐性检验对于呈正态分布且方差齐者行方差分析。经计算，各组数据均符合要求。
[1] [2] 下一页 |
