2.1 real-time RT-PCR 设定对照组mRNA相对表达量为1作标准，6, 12, 24h组NF-кB p65mRNA相对表达量为0.492±0.100, 0.515±0.173, 0.784±0.030(n =3)；6, 12, 24h组 IкBɑ mRNA相对表达量为0.929±0.055, 0.915±0.039, 1.354±0.105(n =3)。经统计分析，培养基加入1μmol/L曲伏前列腺素后， 6, 12, 24h NF-кB p65的表达均明显下降(F = 17.068, P =0.001)；IкBɑ 表达相比0h组在6, 12h组改变不明显（P =0.205,P =0.133）,24h高于对照水平（P =0.000）。

    2.2免疫荧光半定量分析 对照组，6, 12, 24h组NF-кB p65荧光强度为176.65±14.34,119.90±12.54,155.81±9.15,146.71±8.23（n =4）；对照组，6,12,24h组IкBɑ的荧光强度为107.62±7.26, 99.16±8.67, 94.82±5.33,129.67±8.08（n =4）。结果显示培养基加入1μmol/L曲伏前列腺素后,与对照组比较，6, 12, 24h p65的荧光强度均明显下降（F =17.216，P =0.000）(n =4)；IкBɑ荧光强度在6h改变不明显（P =0.134）,12h轻微下降(P =0.032)，24h高于对照水平（P =0.001，n =4）。

    2.3 ELISA法检测磷酸化NF-кB p65蛋白 对照组, 6, 12, 24h组的磷酸化p65与p65的A比值均数分别为0.930±0.0196, 0.855±0.090, 0.742±0.055, 0.684±0.030（n =3）。呈现逐渐降低趋势（F =15.4，P =0.001）。

    3讨论

    前列腺素是一组具有20碳的聚合不饱和脂肪酸的总称。自1970年代末期发现具有明显的眼压调控作用后，其研究受到广泛关注。现在前列腺素类药物已逐渐成为临床眼科治疗青光眼的一线用药。曲伏前列腺素travoprost是一种选择性的黄素蛋白(flavoprotein, FP)前列腺类受体激动剂。通过对动物和人体的研究证实，前列腺素类降眼压药物是通过和特定前列腺素受体结合并且启动细胞内信号级联反应，引起基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMPs）释放到睫状肌肌束周围，从而减少葡萄膜巩膜引流途径的细胞外基质，降低房水外流阻力，促进房水流出[7,8]；同时前列腺素可松弛睫状肌纵性纤维，使葡萄膜巩膜房水引流增加，两种机制共同作用最终导致眼压降低[9]。

    NF-кB是一类能特异地结合DNA 的Rel类蛋白质二聚体转录因子，在静息细胞中， NF-кB与抑制蛋白 IкB s结合形成复合物，并被滞留于细胞质中而处于非活化状态；当细胞受到各种胞外刺激时，IкBs被迅速降解， NF-кB得以释放磷酸化并进入细胞核，从而发挥其转录调节功能[10]。 NF-кB /IкB系统通过调控众多靶基因的转录而在免疫、炎症反应、细胞增殖与凋亡以及肿瘤的发生中发挥重要作用。研究发现，NF-кB作为广泛存在于各种细胞的核转录调控因子，可能与葡萄膜巩膜房水流出通道的多种细胞信号调控有关。许多研究证实NF-кB的激

        活可以上调基质金属蛋白酶MMPs的表达[11]， 同时NF-кB通路也可作用于细胞外基质成分, 且调控睫状肌松弛的重要因子cAMP和cGMP均是NF-кB的上游强有力的抑制因子[12]。Yousufzai等[13] 研究发现，肾上腺髓质激素可促cAMP合成使虹膜括约肌松弛。另外， Rahman等[14]认为，内皮细胞中的cAMP可通过激活p38MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）通路，从而抑制NF-кBp65的活化和细胞间粘附因子的表达。

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