陈梦飞 陈琴 孙雪荣 冷云霞 钟秀凤 刘炳干 黄冰 高前应 葛坚

　　中山大学眼科中心 中山大学干细胞与组织工程中心 510060

　　目的：本研究旨在体外诱导小鼠成纤维细胞重编程为多潜能干细胞，并进一步诱导其向视网膜神经节样细胞分化。

　　方法：为了诱导产生iPS(induced pluripotent stem cells)细胞，用包含Oct4、Sox2、c-myc 和Klf4四种转录因子转入尾尖成纤维细胞(TTF)，诱导产生iPS克隆。通过高表达Math5，并添加Dkk1、Noggin和DAPT促进iPS靶向分化为视网膜节样细胞(RGCs-like cells)。

　　结果：重编程获得的iPS细胞在形态、增殖能力与小鼠胚胎干细胞(ES)相似，并表达AP、SSEA-1 and Nanog等ES细胞表面标记和ES标记基因，具有多向分化潜能。Dkk1、Noggin可诱导iPS细胞进一步高表达Pax6。过表达Math5，可激活RGCs相关基因，促进iPS细胞靶向分化为RGCs-like细胞。而DAPT可进一步促进Brn3b与Thy1的表达。

　　结论：1.通过细胞因子与math5基因表达调控相结合的策略，可以靶向诱导iPS细胞向视网膜神经节样细胞分化。2.由体细胞重编程来源的视网膜神经节样细胞(reprogramming derived RGC-like cells)能够与宿主细胞实现整合。