邱庆华   李彩红   吴星伟   陈志义

上海交通大学附属第一人民医院   200080

目的：探讨灵杞黄斑颗粒对兔视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用。

方法：酶消化法分离获取悬浮的细胞进行青紫蓝兔RPE细胞原代培养，外源性加入H2O2诱导RPE细胞凋亡制作氧化损伤模型，采用灌胃方式给中药，采取含药血清，加入氧化损伤细胞培养模型，流式细胞法检测细胞凋亡，MTT检测细胞增生活性。实验细胞分分5组：分别加入10%对照组血清（NC）、无血清DMEM/F12培养液+H2O2（M）、10%对照组血清+H2O2（MS）、10%低剂量含药血清+H2O2（ML）、10%高剂量含药血清+H2O2（MH）。同时测定SOD等抗氧化酶的活性以及MDA等不饱和醛类的水平，来反映RPE细胞的抗氧化能力与氧化损伤程度，并用 western blot方法检测caspase-3及bcl-xL蛋白表达的变化。

结果：实验结果显示与NC组相比，其余各组MTT检测的OD值均有下降，M组和MS组与NC组相比，对细胞增殖的抑制作用有明显统计学意义（P<0.01）。ML组和MH组的细胞相对活力有所上升，并呈剂量依赖性关系。除M组和MS组外，各实验组相比有显著差异（P<0.0001）。NC组TUNEL染色均为阴性，未见到黄色阳性RPE细胞核；M和MS组中可见大量黄色TUNEL阳性着色的RPE细胞核；ML组中见有散见的少量黄色TUNEL阳性着色的RPE细胞核；MH组黄色TUNEL阳性着色的RPE细胞核进一步减少，数量明显少于M组。

结论：灵杞黄斑颗粒对兔视网膜色素上皮细胞氧化损伤的具有很好的保护作用。