视光学             2575                                      PO0711

　　形觉剥夺对豚鼠锥视蛋白表达的影响研究

　　李瑾 褚仁远瞿小妹 胡敏 笪翠弟

　　复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科  200031

　　目的：观察形觉剥夺对豚鼠锥细胞视蛋白表达的影响。

　　方法：出生一周豚鼠28只,分为正常对照组(n=14)，形觉剥夺组(n=14)，按自然亮暗周期饲养。形觉剥夺组随机选取一眼以半透明橡胶遮盖。正常对照组随机选择一眼作为对照。四周后取眼球行RT-PCR技术检测神经视网膜M-视蛋白和S-视蛋白的mRNA表达，并进行豚鼠视网膜铺片后免疫组织化学方法观察两种视蛋白的分布和表达密度，一抗为兔抗鼠红/绿锥视蛋白抗体或蓝锥视蛋白抗体，二抗为羊抗兔IgG带488荧光抗体。以Leica光学显微镜和Leica共聚焦显微镜观察豚鼠视网膜腹侧（下方）和背侧（上方）及中央区的锥细胞视蛋白的表达。

　　结果：实验前屈光状态为：5.63±0.87D（对照眼），5.47±1.02D（FDM处理眼），四周后屈光状态分别为：4.38±1.02D（对照眼），-3.03±0.78D（FDM处理眼）； 屈光度的改变分别为:1.25±0.53D， -8.38±1.44D。正常豚鼠的视网膜短波敏感锥细胞（Short wave-length sensitive opsin, S-opsin）分布为腹侧（下方）多于背侧（上方）；中央密度最高，密度变化为突变。豚鼠的中波敏感锥细胞（Medium wave-length sensitive opsin ,M-cone）分布在背部(上方)多于腹侧(下方)，中央密度最高，密度变化为渐变；正常组S-opsin的表达密度：下方为8050.0 ±203.3mm-2，上方为1000.0±57.7mm-2；中央为16370.2±314.1 mm-2。FDM组：下方为6409.0 ±196.8 mm-2；中央为: 10167.0 ±144.6mm-2，上方为709.6±30.8 mm-2；正常组M-opsin的表达密度：上方为9462.5 ±388.5 mm-2，中心为16667.3±137.8mm-2，下方为1750.4±100.9mm-2；FDM组：上方为14367.5±366.0 mm-2，中心为: 27800.0 ±1805.5 mm-2，下方为3182.5 ±172.7 mm-2。RT-PCR检测示M-视蛋白的相对光密度值为1.06±0.07(FDM眼)，0.51±0.10(对照眼)，S视蛋白的相对光密度值为0.70±0.07(FDM眼)，1.25±0.06(对照眼)。FDM眼与对照眼相比，M视蛋白的mRNA表达均增加，S视蛋白的mRNA表达均下降，两因素方差分析示差别均有统计学意义（二者均P<0.05）。形觉剥夺性近视眼视网膜三个观察区域M-opsin的表达均较正常对照增加，S-opsin的表达减少，差别均有统计学意义（P<0.05）（二者均P<0.05）。

　　结论：形觉剥夺性近视眼M-opsin的表达增加， S-opsin的表达减少，提示感光细胞锥细胞的视蛋白表达有可能在近视的发生发展中起了作用。

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