马骁 黄一飞

中国人民解放军总医院 北京 100853

目的 使用羟基磷灰石（HA）对人工角膜纯钛（Ti）支架进行表面改性。体外及体内实验观察经HA改性后钛支架的生物相容性是否增加。

方法 1. 酸碱两步预处理法在钛支架表面快速沉积HA涂层2.体外实验：将第4代兔角膜基质成纤维细胞接种于经HA表面改性的Ti及纯Ti表面，玻璃作为实验对照组。3h、24h、48h、72h后，丫啶橙染色法及SEM观察材料表面细胞的粘附，伸展和增殖情况3.体内实验：将18只正常新西兰白兔随机分为3组，于右眼角膜基质层内分别植入经HA改性的人工角膜Ti支架及未经任何处理的Ti支架，第3组仅作角膜板层切口作为手术对照组。术后裂隙灯观察角膜水肿及新生血管产生情况、支架的存留时间和并发症。术后8w、16w取材行HE 染色及Vimentin免疫组化染色观察人工角膜支架与宿主角膜组织的界面愈合情况。

结果 1.体外实验：细胞接种3小时后，材料表面的细胞扩展面积：HA改性的Ti>玻璃> Ti。细胞接种24小时、48小时、72小时后，HA改性的Ti表面（HA-Ti）的活细胞数明显多于其他材料表面(p＜0.05)。SEM观察发现HA-Ti表面的细胞扩展面积最大，细胞张力丝最长。72小时后，HA-Ti表面完全被胶原覆盖。2.体内实验：各组术后均出现不同程度的角膜水肿和新生血管。HA-Ti组及Ti组的角膜新生血管在术后4w达到高峰，两组相比无统计学差异。术后8w、16w组织学检查见各组材料与组织界面间均无炎症细胞浸润。HA-Ti 组的HA涂层与角膜组织之间可见淡粉色无定形物质存在，考虑为蛋白质成份。与Ti组相比，HA/Ti 组的材料与组织界面处角膜成纤维细胞数明显增加。

结论 人工角膜Ti支架经HA改性后，提高了其生物相容性。